摘要： 近年来，美人鱼发光杆菌对水生动物的侵染增多，目前依赖抗生素治疗导致耐药性和安全问题，疫苗可有效预防疾病并减少抗生素使用。灭活疫苗与佐剂联用能显著增强免疫效果，更好地抵御病原菌侵袭。本研究通过不同浓度的黄芪多糖佐剂与美人鱼发光杆菌灭活疫苗的不同配比，通过腹腔注射免疫斑马鱼，系统评价其免疫增效作用，选定最佳配比及黄芪多糖浓度。结合非特异性指标 (ACP、AKP、SOD、MDA、LZM)，发现黄芪多糖在 0.2 mg?mL?1 浓度下与灭活疫苗配比为 1:3 (v: v) 免疫效果和安全性上表现最优。通过测定荧光定量 PCR 检测显示，黄芪多糖灭活疫苗在免疫初期 (1~21d) 相较于对照组显著上调 IL-1β (18.1 倍) 和 TNF-α (17.01 倍) (P<0.05) 并于中后期持续激活 MyD88 基因 (峰值 4.86 倍)，且 Mx 持续升高至达到峰值 (较对照组倍，P<0.05)，形成长效免疫应答。灭活疫苗组虽趋势相似，但 MyD 在时与对照组无显著差异，揭示黄芪多糖通过增强抗原提呈效率延长免疫时效。单独黄芪多糖组 TNF-α 全程高表达但波动有限，ILβ 和 Mx 无显著性上调，MyD88 在 21d 后显著受抑 (P<0.05) 表明黄芪多糖单独作用依赖非 MyD88 通路，需协同抗原实现持续激活。攻毒实验显示，黄芪多糖佐剂疫苗组的免疫保护率 (RPS) 达 74%，显著高于灭活疫苗组 58.3%。本研究通过实验验证了在灭活疫苗制剂中添加适宜佐剂的必要性，以美人鱼发光杆菌灭活疫苗为模型体系，创新性地引入黄芪多糖作为免疫佐剂，实验数据显示，该佐剂剂不仅能显著增强特异性免疫效应，更可使免疫应答持续时间延长。

关键词: 黄芪多糖；灭活疫苗；佐剂；斑马鱼；美人鱼发光杆菌

中图分类号: 

• S942.5