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农业与技术 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (9): 93-97.DOI: 10.19754/j.nyyjs.20230515021

• 畜牧科学 • 上一篇    下一篇

山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR检测方法的建立与应用

啜微微 耿庆华 赵永刚 孟祥勇 张敏 韩小虎 赵治国 付海滨   

  1. 1.沈阳海关技术中心,辽宁沈阳100016;2.中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266033; 3.沈阳农业大学,辽宁沈阳110866;4.呼和浩特海关技术中心,内蒙古呼和浩特010020
  • 出版日期:2023-05-15 发布日期:2023-05-15
  • 作者简介:啜微微(1986-),女,本科,兽医师。研究方向:动物检疫;通讯作者耿庆华(1977-),女,博士,研究员。研究方向:动 物传染病检测方法。
  • 基金资助:
    2022年辽宁省农业地方标准制修订项目计划(项目编号:2022257);沈阳市科技局科学技术计划项目(项目编号:21-108-9-37)
  • Online:2023-05-15 Published:2023-05-15

摘要: 为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus,,SPPV)快速荧光PCR检测方法,本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对,设计合成特异性荧光PCR引物和探针,构建了该病原特异性基因P32的重组质粒。建立了可以同时检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行研究,结果显示该方法具有高度的特异性,除了识别山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组外,对羊的基因组及山羊和绵羊常见病原的基因组均不发生交又反应。在敏感性和重复性实验中,该方法对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测限为10O0 Copies·mL,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测实验室模拟制备的样品,检测结果与预期相符合。

关键词: 山羊痘病毒;绵羊痘病毒;荧光PCR方法

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